ITS(胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒)
細(xì)胞和組織在體外能夠成功生長,有賴于培養(yǎng)方法的優(yōu)化,一般是試圖模擬體內(nèi)的生理?xiàng)l件。該技術(shù)的一個關(guān)鍵因素是培養(yǎng)基的選擇。培養(yǎng)基中通常需添加動物血清。血清是由諸多成分組成的高度復(fù)雜的混合物,這些成分包括生長因子、激素、微量元素以及粘附和伸展因子等,它們發(fā)揮著多種生物學(xué)活性。
血清中白蛋白的含量高,這有助于細(xì)胞狀態(tài)的維持,作用機(jī)制包括防止pH值波動、抑制蛋白酶活性和保護(hù)細(xì)胞免受剪切力的傷害等。盡管血清可以很好地維持細(xì)胞和組織的生長,但其作為培養(yǎng)基添加物具有明顯的缺點(diǎn),如成本較高、貨源減少、實(shí)驗(yàn)變異性大、可能影響下游操作和存在潛在的污染源和不利因素等。此外,人們對動物保護(hù)意識的提高也限制了血清的使用。血清在細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中的這些缺點(diǎn)使得近些年在科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域,人們對無血清培養(yǎng)基的需求日益增大。
除了能夠克服血清的缺點(diǎn),無血清培養(yǎng)基還具有兩個突出的優(yōu)點(diǎn),即可針對特定的細(xì)胞類型配制專用的培養(yǎng)基,以及可精確地控制細(xì)胞的增殖和分化過程。基礎(chǔ)的無血清培養(yǎng)基雖然營養(yǎng)豐富、可足量提供細(xì)胞所必須的營養(yǎng)成分,但通常還需要進(jìn)一步添加特定的組分,如生長因子、脂肪酸、維生素和微量元素等。多年的實(shí)踐表明,對于大多數(shù)細(xì)胞的無血清培養(yǎng)基,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基(多為DMEM/F12)中必須額外添加ITS(胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒)。
胰島素 (Insulin)
可促進(jìn)細(xì)胞生長,調(diào)節(jié)細(xì)胞對葡萄糖、氨基酸和脂類的攝取和利用。胰島素也具有抵抗細(xì)胞凋亡的作用。在哺乳動物細(xì)胞的無血清培養(yǎng)時(shí),重組胰島素的添加濃度遠(yuǎn)高于其生理濃度,這樣胰島素除能與胰島素受體(Insulin Receptor, IR)結(jié)合,發(fā)揮代謝調(diào)節(jié)和抗凋亡作用外,還可通過激活胰島素樣生長因子(IGF-I)的受體,發(fā)揮促有絲分裂和抗凋亡作用,產(chǎn)生生長因子效應(yīng)。
轉(zhuǎn)鐵蛋白 (Transferrin)
是血清中富含的一種糖蛋白,能與三價(jià)鐵離子可逆性結(jié)合。其在鐵離子的轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,同時(shí)也是一種重要的胞外抗氧化劑。因此,轉(zhuǎn)鐵蛋白是無血清培養(yǎng)基必不可少的添加物。轉(zhuǎn)鐵蛋白最初是從血清中分離出來的,然而由于批間差大和安全性差等問題,重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白被越來越廣泛地應(yīng)用。從各種表達(dá)系統(tǒng),包括植物中獲得的重組轉(zhuǎn)鐵蛋白均具有相似的活性。
硒 (Selenium)
是一種微量元素,它是谷胱甘肽過氧化物酶、硫氧還蛋白還原酶和其他抗氧化物酶的關(guān)鍵組分。硒已被確認(rèn)是無血清培養(yǎng)基的必須添加物。
乙醇胺 (Ethanolamine)
是一種有機(jī)化合物,它既是伯胺也是伯醇,可作為磷脂合成的前體。乙醇胺在雜交瘤細(xì)胞的增殖中發(fā)揮著重要的作用,因而經(jīng)常添加到雜交瘤細(xì)胞的無血培養(yǎng)基中。乙醇胺也用于其它類型細(xì)胞的無血清培養(yǎng)。
ITSE(胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒-乙醇胺)
為什么選擇ITSE?
選擇ITSE添加物而非通常所用的ITS的優(yōu)勢在于:用戶自己往往意識不到他們培養(yǎng)的細(xì)胞需要乙醇胺才能達(dá)到最佳的生長狀態(tài),使用ITSE添加物可保證所有類型的細(xì)胞均能得到充足的營養(yǎng)供應(yīng)。
產(chǎn)品信息
其它無血清培養(yǎng)基添加物產(chǎn)品